29 марта 1595 года объединённая эскадра прибыла к Ресифи. Там Ланкастер обнаружил три голландских флейта; он заключил с их капитанами соглашение о совместном разделе будущей добычи. После этого Ланкастер предпринял штурм города одновременно и с суши, и с моря, который увенчался успехом. Португальский гарнизон сбежал в Олинду, а потери англичан были незначительны.
Ланкастер удерживал Ресифи в течение месяца. За это время в порт прибыли несколько французских корсарских кораблей, их команды также приняли участие в разграблении города и захвате Олинды, откуда португальцы постоянно беспокоили англичан.
В конце концов французские, английские и голландские суда (их Ланкастер зафрахтовал для доставки части захваченного в Англию) покинули Ресифи. Англичане прибыли в Даунс в июле 1595 года с грузом сахара, леса, пряностей и других товаров общей стоимостью более 50 000 фунтов.
31 декабря 1600 года королева Елизавета I подписала указ о создании
английской Ост-Индской компании, которой предоставлялось право на монопольную торговлю с Востоком (от Индии до Китая). Уже 13 февраля 1601 года первая торговая экспедиция компании стартовала из Вулиджа. Руководство Ост-Индской компании решило, что возглавить флотилию из 4 кораблей должен Джеймс Ланкастер, имевший опыт плавания в Индийском океане в 1591-1593 годах (это было первое путешествие англичан в Юго-Восточную Азию вокруг мыса Доброй Надежды). Старшим лоцманом экспедиции был другой известный мореплаватель,
[Для просмотра данной ссылки нужно зарегистрироваться].
Обогнув Африку и зайдя на Никобарские острова, флотилия прибыла на Суматру в июне 1602 года. Ланкастер, имевший официальный статус посланника королевы Англии к монархам Востока, заключил альянс с султаном Ачеха и основал первую факторию Ост-Индской компании в Бантаме (Ява). Кроме того, английские купцы заключили несколько выгодных торговых сделок, в том числе с жителями Молуккских островов, богатых пряностями.
20 февраля 1603 года экспедиция отправилась в обратный путь и 11 сентября прибыла в Лондон. Коммерчески она была очень успешной, к тому же теперь Англия установила своё присутствие в одном из важнейших регионов мировой торговли. В октябре 1603 года король Яков I пожаловал Джеймсу Ланкастеру
рыцарское звание.
До своей смерти в июне 1618 года Ланкастер был одним из директоров Ост-Индской компании. Он занимался организацией экспедиций в Азию и в Америку, на поиски Северо-Западного прохода. В 1616 году
[Для просмотра данной ссылки нужно зарегистрироваться] назвал пролив между островами Девон и Баффинова Земля в честь Джеймса Ланкастера.
Во время плавания вокруг Африки в 1601 году команды трёх кораблей Ост-Индской компании жестоко страдали от цинги, и только на "Красном драконе", флагмане торговой эскадры, положение было намного лучше. Ланкастер заставлял моряков своего судна ежедневно выпивать три ложки лимонного сока, что стало эффективным профилактическим средством. Он сделал длительную остановку на Мадагаскаре, чтобы пополнить запасы апельсинов и лимонов, и уже потом отправился к Суматре. Лимонный сок как профилактика против цинги применялся и в следующих экспедициях компании.